梯度PCR儀反應(yīng)條件三要素“相互互補(bǔ)”
發(fā)布時間:2015-04-08 閱讀:556次
梯度PCR儀在眾多的品牌種類中如何脫穎而出,用戶在選購時應(yīng)該考慮的因素,在使用中PCR反應(yīng)條件三要素是什么,下面小編一一解答。
、如何選購梯度PCR儀?
現(xiàn)在普通pcr儀技術(shù)很成熟了,很多公司都有生產(chǎn),技術(shù)指標(biāo)很多但其實對使用者來說抓住以下3點就足夠了,其余就是比比價格看看國產(chǎn)還是進(jìn)口什么的。
1.控溫模塊材料。鋁塊的導(dǎo)熱速率快,也是現(xiàn)在比較常用的模塊材料。
2.編程方式。過去pcr儀都是鍵盤編程,新來實驗室人員都要花時間學(xué)習(xí)如何使用。
3.升降溫速率。不能太慢也別快得夸張,太快太慢都不利于基因擴(kuò)增,快升溫4以上,快降溫能達(dá)到2.8就很好很好了。
第二、PCR反應(yīng)條件三要素為溫度、時間和循環(huán)次數(shù)。
1.變性溫度與時間:變性溫度低,解鏈不完全是導(dǎo)致PCR失敗的主要原因。
2.退火(復(fù)性)溫度與時間:退火溫度是影響PCR特異性的較重要因素。
3.延伸溫度與時間:Taq DNA聚合酶的生物學(xué)活性:
70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子
70℃ 60核苷酸/S/酶分子
55℃ 24核苷酸/S/酶分子
高于90℃時, DNA合成幾乎不能進(jìn)行。
以上就是小編整理總結(jié)的關(guān)于梯度PCR儀的知識,你們懂了么?