基因擴增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
發(fā)布時間：2014-04-08 閱讀：453次
PCR原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
這種方法的特點是：實驗人員勞動強度大，容易因疲勞引起差錯；而優(yōu)點是:設(shè)備簡單，投資少，與自動化基因擴增儀相比，它無須升降溫過程，實驗時間短，試驗接近理想PCR反應(yīng)條件，事實表明實驗效果還是不錯的，但由于標(biāo)本試管從一個水浴箱往另一個水浴箱移動中要較短暫暴露于空氣中，因此如移動速度不夠快時也會對標(biāo)本形成溫度干擾，影響結(jié)果。本方法的另外一些缺點包括只能局限三個溫階、液體污染以及在低氣壓地區(qū)水溫難以燒到94℃變性溫度等。
基因擴增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
1.獨有的瞬時斷電保護(hù)功能:瞬時停電后本儀器可提醒用戶繼續(xù)試驗。
2.良好的線性范圍、靈敏度、重復(fù)性:線性范圍廣、可檢測的樣品濃度線性范圍101~1010,基因擴增儀靈敏度小分辨率為1拷貝,重復(fù)性CV≤2.1%。
3.多樣化的運行方式:基因擴增儀每個程序段數(shù)多達(dá)9個;每個程序的步驟多達(dá)9個;每個程序的循環(huán)數(shù)多達(dá)99個,溫度、循環(huán)等多個參數(shù)的多種修正、調(diào)節(jié)方式,可完全滿足臨床及科研上試驗的要求。
實時熒光定量PCR不但能有效地檢測到基因的突變，而且可以準(zhǔn)確檢測癌基因的表達(dá)量。目前用此方法進(jìn)行過端粒酶hTERT基因、慢性粒細(xì)胞性白血病WT1基因、腫瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、腫瘤相關(guān)的病毒基因等多種基因的表達(dá)檢測。隨著與腫瘤相關(guān)的新基因的不斷發(fā)現(xiàn)，熒光定量PCR技術(shù)將會在腫瘤的研究中發(fā)揮大的作用。
