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熒光定量pcr儀數據分析水平如何?

發布時間:2014-12-04 閱讀:948

熒光定量pcr儀數據分析水平
熒光定量pcr儀,由熒光定量系統和計算機組成,用來監測循環過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過開發的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數據進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平,這就是分析熒光數據的水平。

第二、熒光定量pcr儀應用領域介紹
1.定量實驗:病原體定量檢測;動、植物轉基因檢測等。
2.相對定量實驗:表達差異分析等;gDNA拷貝數變化(CNV)差異分析;甲基化差異分析等。
3.定性分析實驗:等位基因/SNP差異分析;病原體定性檢測及耐藥分析;生物品種鑒定等。
4.蛋白穩定性實驗:化合物篩選,蛋白穩定性方面的研究等。

第三、熒光定量pcr儀的快速熱循環
實時熒光定量 PCR 系統的標準模式采用 25-100 微升反應體積,可以采用 96 孔板或單管 /8 聯管進行實驗反應。另外7500 還可以升級為快速熱循環樣品基座,該升級為選購件。快速熱循環樣品基座采用 96 孔反應板,這種反應板的管內液體上方的空間較小,可以支持 5-30 微升反應體積的實驗。

第四、PCR
樣品到達域值水平所經歷的循環數稱為Ct值。域值應設定在使指數期的擴增效率為大,這樣可以獲得準確,可重復性的數據。如果同時擴增的還有標有相應濃度的標準品,線性回歸分析將產生一條標準曲線,可以用來計算未知樣品的濃度。

第五、如何選擇合適的定量PCR儀
定量的儀器建議買進口的,技術相對成熟一些,而且產地也要在國外。有很多進口品牌是在設廠的。然后就是價格,有的價格高,有的價格低,相同價格下就看性能了。就像買一樣,高端的很多功能根本用不上,低端的又根本不能用,選擇合適自己的。

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